目前有哪些比較熱門的腫瘤單細(xì)胞制備技術(shù)？

• 基于酶解的試劑盒法

• 腫瘤組織快速解離試劑盒2：采用三階酶控解離技術(shù)，由膠原酶 VI、中性蛋白酶及熱滅活胎牛血清組成定向酶解系統(tǒng)。能空間選擇性裂解腫瘤間質(zhì)中的膠原纖維，含鈣離子穩(wěn)定劑保護(hù)膜結(jié)構(gòu)，還有 RNase 抑制劑保護(hù) RNA。配套漸進(jìn)式篩網(wǎng)系統(tǒng)和離心渦旋技術(shù)，可將細(xì)胞活性維持在 93% 以上，且解離耗時短，僅 35 分鐘，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)機(jī)械研磨法。

• Miltenyi Tumor Dissociation Kit：專為從人類腫瘤組織溫和快速地生成單細(xì)胞懸液而開發(fā)，針對高產(chǎn)量的腫瘤細(xì)胞和腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞進(jìn)行了優(yōu)化，同時保留重要的細(xì)胞表面表位，非常適合與 gentlemacs™解離器結(jié)合，實(shí)現(xiàn)省時且可重復(fù)的單細(xì)胞懸液制備。

• 單細(xì)胞多組學(xué)測序技術(shù) Parallel - seq1：由清華大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院張強(qiáng)鋒副教授課題組開發(fā)，結(jié)合了組合條形碼標(biāo)記與微液滴測序技術(shù)，實(shí)現(xiàn) “微液滴過載" 策略。可高通量、低成本地在同一個單細(xì)胞中同步測量基因表達(dá)（scRNA - seq）和染色質(zhì)可及性（scATAC - seq）。一次實(shí)驗(yàn)可并行分析數(shù)十萬乃至百萬級細(xì)胞，支持多樣本的多組學(xué)聯(lián)合分析，降低批次效應(yīng)影響，單個細(xì)胞成本僅為現(xiàn)有技術(shù)的約 1/30。

• 機(jī)械解離與酶解結(jié)合法：通過機(jī)械離解和酶解離的組合，例如使用剪刀、鑷子等器械先將腫瘤組織剪碎，再利用組織研磨器等進(jìn)一步破碎，然后結(jié)合膠原酶 / 透明質(zhì)酸酶混合物等進(jìn)行酶解，最終獲得較高存活率的單細(xì)胞懸浮液。這種方法可以充分發(fā)揮機(jī)械解離和酶解的優(yōu)勢，在保證細(xì)胞活性的同時，提高解離效率。